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211 人阅读发布时间:2025-03-27 16:33
染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是一种检测在体内自然染色质环境下蛋白和DNA相互作用的有效方法。这种技术广泛应用于检测特定基因调节蛋白结合在基因组中的具体位置或者基因调节区域和蛋白的修饰是否相关。因其能真实、完整地反映结合在DNA序列上的靶蛋白的调控信息,是目前基于全基因组水平研究DNA-蛋白质相互作用的标准实验技术,日益成为研究真核细胞中转录调控情况的重要途径。
该技术主要应用于:组蛋白的修饰研究;染色质表观遗传修饰研究;转录调控分析;药物开发研究;有丝分裂研究;DNA损伤与凋亡分析等。
在活细胞或组织的状态下固定蛋白质-DNA复合体,再将染色质DNA随机打断成小片段, 通过目的蛋白的特异性抗体富集与目的蛋白结合的DNA片段。通过PCR或qPCR技术检测富集产物中的特定DNA片段的含量可以定性分析目标蛋白与特定DNA片段是否结合;或通过对富集产物进行测序分析,筛选可能与目的蛋白结合的DNA片段。

